Prisys Biotechnology에서는 올리고뉴클레오티드- 기반 약물, 특히 siRNA(소형 간섭 RNA) 치료제에 대한 관심이 높아지고 있음을 인정합니다. siRNA는 소분자 약물 및 항체{2}} 기반 치료법에 이어 3세대 치료제를 대표하며 약물 개발 분야에 혁명을 일으킬 수 있는 큰 잠재력을 보여주었습니다.
siRNA 작용 메커니즘:
siRNA는 Watson-Crick 염기쌍 원리를 활용하여 상보적인 mRNA 가닥에 결합함으로써 전사 및 번역 과정에 영향을 미치는 약 20개의 염기로 구성된 짧은 뉴클레오티드 서열입니다. 구조적 및 기계적 변형을 기반으로 siRNA는 ASO(안티센스 올리고뉴클레오티드), siRNA(소형 간섭 RNA), saRNA(소형 활성화 RNA), miRNA(마이크로RNA) 및 앱타머로 분류됩니다. 그 중에서도 siRNA는 유망한 치료 효능과 기술 발전으로 인해 큰 주목을 받아왔습니다.
화학적 변형 및 전달 시스템의 중요성:
변형되지 않은 siRNA는 반감기가 짧고 -표적을 벗어난 독성이 발생할 위험이 있습니다. 화학적 변형과 적절한 전달 시스템은 치료 효과를 달성하는 데 중요한 역할을 합니다. 앞서 언급한 6가지 승인된 siRNA 약물은 포스포로티오에이트 백본 변형 및 2'-O-Methyl(2-OMe), 2'-O-Methoxyethyl(2-MOE) 및 2'-Fluoro(2-F)와 같은 리보스 변형과 같은 화학적 변형을 거쳤습니다. 또한, siRNA 전달의 효율성은 LNP 및 GalNAc 접합체와 같은 고급 전달 시스템에 달려 있으며 둘 다 간 표적화 기능을 입증했습니다.
전임상 안전성 평가 및 동물 종 선택:
siRNA 약물의 전임상 안전성 평가에는 동물 모델에서 표적-특이적 독성과 비표적 독성-을 평가하는 과정이 포함됩니다. 설치류와 비{3}}인간 영장류(NHP)를 포함한 동물 종의 선택은 siRNA 약물의 특정 특성에 따라 달라집니다. 예를 들어, 영장류 종은 표적 mRNA 서열 측면에서 인간과 높은 상동성을 나타내며 siRNA 약동학 및 약력학에 대한 더 나은 평가를 제공합니다. 안전성 평가를 위해 인간이 아닌 영장류를 활용하는 것은 일반적인 관행이었으며, 특히 간을 표적으로 하는 siRNA 약물의 경우 더욱 그렇습니다.
간 독성 및 면역 반응:
간은 siRNA 치료제에서 중요한 관심 기관입니다. 승인된 siRNA 약물은 간-특이적 전달, 간세포 흡수 및 잠재적인 간독성과 관련된 다양한 특성을 입증했습니다. 조직병리학적 연구에 따르면 간세포 공포화, 염증성 침윤 및 알라닌 트랜스아미나제(ALT) 및 아스파르테이트 트랜스아미나제(AST)와 같은 간 효소의 경미한 상승이 밝혀졌습니다. 항-약물 항체(ADA), 사이토카인 방출, 보체 활성화 및 면역 표현형 분석을 포함한 면역 반응도 평가 및 모니터링되었습니다.
siRNA{0}}매개 유전자 침묵은 엄청난 치료 잠재력을 제공합니다. 그러나 정확한 침묵을 달성하는 것은 어려울 수 있습니다. siRNA가 의도하지 않은 유전자를 의도치 않게 억제하는 오프{3}}표적 효과는 예상치 못한 결과를 초래할 수 있습니다. 일본 의약품의료기기청(PMDA)은 "올리고뉴클레오티드 치료제의 비{5}}임상 안전성 평가에 대한 지침"에서 이를 인정하고 siRNA 독성을 표적 유형과 비{6}}표적 유형으로 분류합니다.
간: 주요 표적, 주요 관심사
간은 siRNA 약물의 주요 관심 기관입니다. 보다 심층적인 조사를 위해 시판 중인 6가지 siRNA 약물을 약물 특성, 약동학, 관찰된 병리학에 중점을 두고 분석합니다. 특히 6개 모두 합성 또는 발현을 위한 간{2}}관련 유전자를 목표로 합니다. 또한 티오인산염처럼 화학적으로 변형되어 높은 단백질 결합을 통해 간독성에 기여할 수 있습니다. 지질 나노입자(LNP)와 N-아세틸갈락토사민(GalNAc) 접합은 모두 간 표적화를 촉진합니다. 예를 들어 LNP-siRNA 약물인 Patisiran의 LNP 중 80-90%가 정맥 투여 시 간에 축적됩니다. GalNAc-siRNA는 세포내 흡수를 위해 ASGPR 매개 세포내이입을 활용하며 ASGPR은 간세포에서 높게 발현됩니다.
간 독성 프로필: 축적부터 염증까지
조직 분포 분석은 간에서 가장 높은 siRNA 농도를 지속적으로 나타냅니다. 예를 들어 Lumasiran은 원숭이에서 10mg/kg에서 76700h*ug/mL의 AUC와 409h의 반감기를 나타냈습니다. 특히 장기- 원숭이 독성 연구에서는 용량에 따른- 조직병리학적 간 변화가 밝혀졌습니다.
1. 간세포/쿠퍼 세포 호염기성 과립: 이는 약물, 대사산물 또는 올리고뉴클레오티드에 대한 세포 적응을 나타낼 수 있습니다.
2. 간세포 공포증: 세포질 호염기성 과립 축적으로 인한 잠재적인 이차 효과입니다.
3. 염증성 침윤: 약물 농도가 높으면 전염증 경로가 활성화될 수 있습니다.-
4. 간세포 단일-세포 괴사: 고용량 투여 시 광범위한 호염기성 과립 축적으로 심각한 병리학적 손상이 발생합니다.
ALT 및 AST와 같은 혈액 생화학 지표의 상승은 종종 이러한 변화를 동반합니다. 그러나 조직 손상, 관련 지수 변경, 가역성 및 다른 siRNA 약물의 유사한 결과를 종합적으로 평가하는 것은 이러한 변화의 실제 유해성을 결정하는 데 중요합니다.
간 너머: 꺼짐-표적 독성 및 면역 자극
서열 상보성-독립적-표적 독성도 주의를 기울여야 합니다. 뉴클레오티드 서열 설계 및 화학적 변형에 크게 의존하는 면역 자극 반응이 하나의 결과입니다. siRNA 약물은 주사 부위 반응(Patiiran, Inclisiran)과 혈소판(PLT) 감소(Patisiran, Givosiran)에 대해 선천적 면역 체계를 활성화할 수 있습니다. 면역 자극 평가에는 관련 마커의 생체 내 분석과 분리된 말초 혈액 단핵 세포 또는 전혈을 사용하여 사이토카인 방출을 예측하는 시험관 내 평가가 포함됩니다.
응고 기능 변화와 같은 비-혼성화-관련 오프-목표 효과도 발생할 수 있습니다. 특정 siRNA 약물은 응고 단계에서 인자 IXa 및 보조 인자 VIIIa를 선택적으로 억제하여 트롬빈 작용 시간을 변경하고 간접적으로 응고를 억제합니다(예: Patisiran, Lumasiran, 약간 상승된 APTT). 또한 siRNA 약물은 억제제 H에 결합하여 보체 우회 경로를 활성화할 수 있습니다. 보체의 과잉 활성화는 보체의 기능을 방해하여 2차 염증 및 혈관염(예: Patisiran{10}}유발 C3a 증가, 간 염증 침윤, 주입 부위의 혈관주위 염증)을 유발할 수 있습니다.
전달 시스템 독성: 운송업체를 간과하지 마십시오
LNP라고 불리는 전달 시스템도 주목할 만합니다. LNP의 새로운 부형제나 변경된 성분 비율은 철저한 조사가 필요합니다. 특정 LNP 지침은 아직 없지만 "업계 지침: 리피오돌 제품 화학, 제조 및 관리, 인간 약동학 및 생체 이용률, 라벨링 문서화"와 같은 기존 지침은 귀중한 통찰력을 제공할 수 있습니다. Patisiran의 LNP 조사도 참고 자료가 될 수 있습니다. 특히 LNP가 비-독립적 부형제 등록 기준에 해당하는 경우 siRNA에 대한 두 가지-종 요건을 고려하여 siRNA의 비{5}}임상 안전성 평가와 동일한 동물 종의 siRNA와 함께 조사할 수 있습니다.
결론:
siRNA 치료제 분야는 전달 시스템 개선, 화학적 변형, 표적 이탈 효과 최소화 및 적응증 확대에 중점을 두고 계속해서 발전하고 있습니다. Prisys Biotechnology는 약물 발견 및 전달 시스템 분야의 전문성을 활용하여 혁신적인 siRNA{2}} 기반 치료법 개발에 전념하고 있습니다. 우리는 충족되지 않은 의학적 요구를 해결하고 환자 결과를 개선하는 혁신적인 치료법을 제공하기 위해 노력하고 있습니다.
